استشراب ورقة
استشراب ورقة Paper chromatography | |
---|---|
Chromatography jar
| |
الاختصار | PC |
التصنيف | استشراب |
تقنيات أخرى | |
متعلقات | استشراب طبقة رقيقة |
كروماتوغرافيا الورق هي احدى طرق التحليل الكيميائية.
الكروماتوغرافيا - هي حدثة مكونة من مبترين: كرومو وتعني لون, وغرافيا وتعني كتابة. وقد سميت بهذا الاسم لأسباب تاريخية حيث كانت تستعمل في البداية لفصل المواد الملونة.
الكروماتوغرافيا الورقية : Paper Chrmatography
في هذا النوع من الكروماتوغرافيا يتم الفصل للمركبات باستخدام طورين هما:
1)الطور المتحرك ( Mobile phase )
ويكون مادة سائلة عادة
2)الطور الساكن ( Stationary phase )
ويكون في الغالب سائل أيضاً محمول على الألياف السليلوزية للورقة , لذلك يطلق عليها أسم كروماتوغرافيا الورق .
أقسام الكروماتوغرافيا الورقية
تنقسم هذه الطريقة إلى قسمين حسب اتجاه سريان المذيب على الورقة إلى :
- أ- الكيفية التصاعدية Ascending حيث يتجة سريان المذيب من أسفل إلى اعلي
- ب- الكيفية التنازلية Descending حيث يتجة سريان المذيب من أعلى إلى أسفل الورقة
أساسيات الكروماتوغرافيا الورقية
- 1- تفصل مكونات المخاليط على أساس اختلاف معامل التوزيع.
- 2-قد يكون الوسط المتحرك إما مذيب واحد أوخليط من المذيبات.
- 3- تستعمل أشرطة ورق كروماتوجرافيا.
- 4- يتحرك الوسط الثابت خلال الوسط المتحرك بإحدى الطرق التالية :
- الخاصيه الشعريه .
- من مركز الدائره إلى محيطها.
- الجاذبيه الارضيه .
- يسمى الشكل الناتج بعد هجر الورقة لتجف كروماتوجرام.
- تسمى المسافه التي يبترها المكون.(Rf) معامل الاعاقه
أنواع الورق المستخدم في الكروماتوغرافيا الورقية
- 1. الأوراق المشبعة بالمحاليل العضوية .
- 2. أوراق التبادل الأيوني.
- 3. أوراق كارهة للماء.
- 4. الأوراق ذات البعدين.
بعض أنواع الأطوار المتحركة المستخدمة في كروماتوغرافيا الورق
- 1. كحول البيوتانول المشبع بحامض الهيدروكلوريك .
- 2. استيل أسيتون المشبع بالماء .
- 3. حامض الخليك الثلجي الحاوي على ( 5% ) من كحول الميثانول
- 4. اثيل - مثيل كيتون .
- 5. كحول الميثانول .
عامل الإعاقة (ƒ R )
ويستفاد من تقنية كروماتوغرافيا الورق في تشخيص المركبات العضوية فقط , حيث يمكن فهم قيمة عامل الإعاقة (ƒ R) للمركبات , ومن ثم مقارنته مع عامل الإعاقة للمركب القياسي ( المعروف الهوية ) فإذا تطابق كان المركب مماثل للمركب القياسي أي إذا عامل الإعاقة(ƒ R) هومقياس لسرعة حركة المكون نسبة إلى الطور المتحرك . ويتم قياس المسافة اعتبارا من خط الابتداء, أي من مركز البقعة.
(ƒ R) = بعد مركز البقعة عن نقطة الأصل / بعد المذيب عن نقطة الأصل
في عملية الفصل الكروماتوغرافي نضع قليلا من المخلوط الذي نود فحصه وذلك على الجزء الثابت, ومن ثم نضع هذا الجزء الثابت في سائلقد يكون تعبير الجزء المتحرك. حيث يقوم السائل بالسريان اخذا معه المخلوط . بطبيعة الحال ليست جميع المواد ذات نفس سرعة الحركة على الجزء الثابت وذلك يرجع إلى عاملين اثنين رئيسيين:
1- ميل المادة إلى الالتصاق بالجزء الثابت.
2 - ميل المادة إلى الذوبان في الجزء المتحرك.
إذا لم تكن المادة قابلة للذوبان في الجزء المتحرك , أوإنها لا تلتصق بالجزء الثابت فإن عملية الفصل الكروماتوغرافي محالة. وبما حتى المخلوط المراد فحصه تعبير عن مواد ذات الفة كيماوية (ميل للالتصاق) مختلفة للجزء الثابت, وذات قدرة مختلفة على الذوبان في المذيبات المتنوعة, فإن النتيجة تكون الفصل الفيزيائي بين المواد المكونة للمخلوط وذلك على سطح الجزء الثابت . إلى غير ذلك يمكن جمع المواد جميع على حدة وفحص صفاتها وكمياتها.
خطوات العمل
1- يتم عمل خط بقلم الرصاص علة ورق الترشيح على بعدخمسة سم من حافة الورقة ثم ضع إشارات × على مسافات متساوية بعدد المحاليل المجهولة والتي يراد فصل مكوناتها مع كتابة اسم جميع محلول أسفل هذه الإشارة .
2- احمل طرف الورقة من جهة الخط باستخدام ساق زجاجية مثلاً بحيث لا تلامس أي سطح أثناء وضع العينات عليها .
3- باستخدام ماصة ( ميكروبيبيت ) خذ ثلاثة ميكروليتر من المحلول المجهول وضعه عند العلامة الخاصة به واهجرها حتى تجف تماماً . يردد العملية عدة مرات لنفس المحلول مع وضع القطرات على نفس المكان .
4- يردد المستوى الثالثة لبقية المحاليل الموجودة لديك مع التأكد من وضع جميع محلول على العلامة الخاصة به . يمكن ثني الورقة على شكل اسطوانة ثم تدبيس أطرافها . بحيثقد يكون الخط المرسوم باتجاه الفتحة السفلى للأسطوانة .
5- ضع المذيب في الوعاء الزجاجي على ازدياد ثلاثة سم من قاع الوعاء ثم ضع ورقة الفصل بحيث تكون الجهة المرسوم عندها الخط مغموسة في السائل المذيب .
6- أغلق الوعاء واهجره لمدة 12 - 14 ساعة ثم أخرج الورقة وانزع الدبابيس عنها وفهم على المنطقة التي وصل إليها السائل .
7- اهجر الورقة حتى تجف تماماً ثم رش الورقة بالمحلول المظهر بواسطة رشاش ثم ضع الورقة في فرن تجفيف عند 80 م لمدة ثلاثة دقائق
التاريخ
تم اكتشاف الكروماتوغرافيا الورقية عام 1943 بواسطة مارتن و سينج قدمت لأول مرة وسائل مسح وكشف مكونات النباتات وفصلها وتحديد هويتها. كان انفجار هذا النشاط في هذا المجال بعد عام 1945م.
انظر أيضاً
- استشراب
- استشراب طبقة رقيقة
- استشراب سائل عالي الأداء
المراجع
- ^ http://lib.njutcm.edu.cn/yaodian/ep/EP5.0/02_methods_of_analysis/2.2.__physical_and_physicochemical_methods/2.2.26.%20Paper%20chromatography.pdf
- ^ British Pharmacopoeia - 2013 - Volume -خمسة - Appendix - ثلاثة -E A201
- ^ Haslam, Edwin (2007). "Vegetable tannins – Lessons of a phytochemical lifetime". Phytochemistry. 68 (22–24): 2713–21. doi:10.1016/j.phytochem.2007.09.009. PMID 18037145.