الحاضنة في فهم الأحياء، هوجهاز يستخدم لتنمية والحفاظ على المستعمرات الميكروبية أومستعمرة الخلية. الحاضنة الأمثل يحافظ على درجة الحرارة، الرطوبة وغيرها من الشروط، مثل ثاني أكسيد الكربون (CO 2 ) والأكسجين محتوى الغلاف الجوي في الداخل. حاضنات ضرورية لكثير من العمل التجريبي في بيولوجيا الخلايا ، فهم الأحياء الدقيقة والبيولوجيا الجزيئية وتستخدم لزراعة جميع من البكتيريا وكذلك حقيقية النواة الخلايا. لم يخترعه الحديد ديل موندو، والفلبينية الأولى، وربما أول امرأة للدراسة في كلية الطب بجامعة هارفارد . وتستخدم أيضا حاضنات في صناعة الدواجن ليكون بمثابة بديل عن الدجاج. هذا غالبا ما يؤدي إلى ازدياد معدلات فقس بسبب القدرة على التحكم في درجة الحرارة والرطوبة على حد سواء. مختلف العلامات التجارية للحاضنات متاحة تجاريا لمربي. ومعزول أبسط حاضنات مربعات مع سخان قابل للتعديل، وعادة ما يمضى ما يصل إلى 60 إلى 65 درجة مئوية (140-150 درجة فهرنهايت)، على الرغم من بعض يمكن حتى تمضى أعلى قليلا (عموما إلى درجة مئوية أي أكثر من 100). درجة الحرارة الأكثر استخداما على حد سواء للبكتيريا مثل استخداما E. كولاي وكذلك لخلايا الثدييات ما يقرب من 37 درجة مئوية، وهذه الكائنات الحية تنموبشكل جيد في ظل هذه الظروف. للكائنات الحية الأخرى المستخدمة في التجارب البيولوجية، مثل الخميرة في مهدها خميرة الخباز ، درجة حرارة النمومن 30 درجة مئوية هوالأمثل. يمكن للحاضنات أكثر تفصيلا تضم أيضا القدرة على خفض درجة الحرارة (عن طريق التبريد)، أوالقدرة على التحكم في الرطوبة أوCO 2 المستويات. وهذا هوالمهم في زراعة خلايا الثدييات، حيث النسبية الرطوبة وعادة> 95٪ والحمضية قليلا الحموضة ويتحقق من خلال المحافظة على ثاني أكسيد الكربون 2 مستوى 5٪. معظم الحاضنات تضم جهاز توقيت، ويمكن أيضا بعض برمجتها لدورة من خلال درجات حرارة مختلفة، ومستويات الرطوبة، وما إلى ذلك حاضنات يمكن حتى تختلف في الحجم من الطاولة إلى وحدات من حجم الغرف الصغيرة. هناك طرق أخرى عديدة لخلق بيئة حاضنة. استخدام الشهير لويس باستور في فتحة صغيرة تحت الدرج له كحاضنة. درجة الحرارة القصوى للتعقيم هو200 س م.

الحاضنة cc

إذا كانت غرفة الساخنة ليست متاحة، قد يحدث من الضروري لشراء حاضنة يعادل الجافة. حتى مع وجود غرفة الساخنة، بل هوأحيانا ملائم للحصول على وثيقة أخرى حاضنة للغطاء محرك السيارة لtrypsinization. وينبغي حتى الحاضنة تكون كبيرة بما يكفي، ~ 50-200 L (1،5-6 قدم ثلاثة ) للشخص الواحد، وينبغي حتىقد يكون القسري في الهواء الدورة الدموية، والتحكم في درجة الحرارة إلى حدود ± 0.2 درجة مئوية، والحرارة سلامة حتى يبتر إذا كان يسخن الحاضنة أو، على نحوأفضل، الذي ينظم الحاضنة إذا كانت الحرارة 1 فشل. وينبغي حتى تكون حاضنة للمقاومة للتآكل (الفولاذ المقاوم للصدأ على سبيل المثال، على الرغم من الألمنيوم من المقبول لحاضنة الجافة) وتنظيفها بسهولة. وغرفة مزدوجة، أواثنين حاضنات مكدسة، واحدة فوق الأخرى، تنظم بشكل مستقل، ويفضل واحدة حاضنة كبيرة لأنها يمكن حتى تستوعب أكثر الثقافات مع سيطرة أفضل درجة الحرارة، وإذا كان نصف فشل أويحتاج إلى تنظيف، والآخر يمكن حتىقد يكون لا يزال المستخدمة. حاضنات الكثير من سترة الماء الساخن لتوزيع الحرارة بالتساوي في جميع أنحاء مجلس الوزراء، وبالتالي تجنب تكوين بقع الباردة. هذه الحاضنات عقد أيضا درجة الحرارة لفترة أطول طالما فشل سخان أوبتر في السلطة. ومع ذلك، الجديدة ذات الكفاءة العالية والعزل ومنتشر عناصر سخان سطح جميعا ولكن القضاء على الحاجة إلى وجود سترة المياه وجعل الانتنطق الحاضنة أبسط بكثير. (سترة احتياجات المياه عموما ينبغي حتى تفرغ إذا الحاضنة انه سيتم نقل.) حاضنة رفوف عادة ماقد يكون مثقب لتسهيل توزيع الهواء. ومع ذلك، يمكن حتى يؤدي إلى ثقوب وجود مخالفات في توزيع خلية في الثقافات أحادي الطبقة، مع وجود اختلافات في كثافة الخلية في أعقاب نمط من التباعد على الرفوف. قد يحدث ذلك بسبب الاختلافات تيارات الحمل الحراري ولدت أكثر من نقاط الاتصال بالنسبة للثقوب في الرف، أوأنها قد تكون ذات صلة إلى المناطق التي تبرد بسرعة أكبر عند فتح الباب. على الرغم من حتى أي معضلة قد تنشأ في الصيانة الروتينية، يجب وضع قوارير وصحون على البلاط معزولة أوعلبة معدنية في التجارب التي كثافة موحد هوالمهم. Trypsinization Trypsinization هوعملية استخدام التربسين، وهوانزيم بروتين الذي تكسر البروتينات، لفصل الخلايا الملتصقة من السفينة التي يجري غرسها فيها. عندما تضاف إلى ثقافة الخلية، التربسين ينهار البروتينات التي تمكن الخلايا على الانضمام إلى السفينة. وكثيرا ما يستخدم Trypsinization إلى الخلايا مرور إلى سفينة جديدة. لأغراض تجريبية، وكثيرا ما تغرس الخلايا في الحاويات التي تأخذ شكل قوارير من البلاستيك أولوحات. في مثل هذه القوارير، وتقدم خلايا مع متوسط نموتتألف من العناصر الغذائية الأساسية اللازمة لانتشار الأسلحة النووية، والخلايا التمسك الحاويات وغيرها من جميع لأنها تنمو. هذه العملية من زراعة الخلايا أوالأنسجة يحتاج وسيلة لفصل الخلايا من الحاوية وبعضها البعض. ويمكن استعمال التربسين، انزيم التي توجد عادة في الجهاز الهضمي، إلى "هضم" البروتينات التي تسهل التصاق إلى الحاوية وبين الخلايا. ويتم ذلك غالبا Trypsinization للسماح بمرور الخلايا إلى وعاء جديد، والمراقبة للتجريب، أوالحد من درجة confluency في قارورة عن طريق إزالة نسبة مئوية من الخلايا.

بالرغم من أنه يمكن تحضين الثقافات في قوارير مختومة في حاضنة وجاف العادية أوفي غرفة الساخنة، وبعض السفن، على سبيل المثال، أطباق بتري أولوحات multiwell، بحاجة إلى جوتسيطر عليها مع ازدياد نسبة الرطوبة والتوتر CO2 مرتفعة. أرخص وسيلة للتحكم في فترة الغاز هووضع الثقافات في صندوق من البلاستيك، أوغرفة ( Shellab ، Biomedicals MP ): الغاز الحاوية مع خليط من CO2 السليم ومن ثم ختم ذلك. إذا لم يكن حاوية مليئة تماما مع أطباق، تشتمل على صحن مفتوحة من الماء لزيادة الرطوبة داخل الغرفة. حاضنات CO2 هي أكثر تكلفة، ولكن سهولة استخدامها والسيطرة متفوقة من التوتر CO2 ودرجة الحرارة (الجرار اللاهوائية وdesiccators يستغرق وقتا أطول في عملية الإحماء) تبرير النفقات. ويتم تحقيق جوتسيطر عليها باستخدام صينية الرطوبة، (الشكل رقم 5.16) والسيطرة على التوتر مع جهاز CO2 CO2 الرصد، الذي يستمد الهواء من الحاضنة في غرفة عينة، ويحدد هجريز CO2، ويقحم CO2 نقية في الحاضنة لتعويض أي نقص. يعمم الهواء حول الحاضنة بواسطة الحمل الحراري الطبيعي أوباستخدام مروحة للحفاظ على حد سواء على مستوى CO2 ودرجة الحرارة موحدة. فمن زعم حتى مروحة وزعت حاضنات الانتعاش بصورة أسرع بعد الافتتاح، على الرغم من حاضنات الحمل الحراري الطبيعي يمكن حتىقد يكون لا يزال انتعاشا سريعا ويقلل كثيرا من مخاطر التلوث. الجافة، وحاضنات جدار ساخنة تشجع أيضا تلوث أقل الفطرية على الجدران، والجدران لا تزال تميل إلى الجفاف، وحتى في الرطوبة النسبية العالية. بعض وحدات التحكم CO2 يجب معايرة جميع بضعة أشهر، إلا حتى استخدام هذه الأسلاك للكشف عن المضى أوالأشعة تحت الحمراء يقلل من الانجراف، والكثير من النماذج إعادة الصفر للكشف عن CO2 تلقائيا. حجم المطلوبة الحاضنة يفترض أن يعتمد على الاستخدام، على حد سواء في أعداد الناس الذين يستخدمونه وأنواع الثقافات. يمكن حتى خمسة أشخاص باستخدام لوحات microtitration فقط لديها 1000 لوحات (~ 100000 الثقافات الفردية) أوعشرة في جميع التجارب حاضنة متواضعة الحجم، في حين حتى شخصا واحدا عمل استنساخ الخلية ويمكن ملء واحدة مع رف واحد أواثنين التجارب. الثقافات قارورة، قارورة كبيرة وخاصة، ليست الاستخدام الاقتصادي للحاضنات CO2. يتم تحضين أفضل ما في حاضنة العادية أوغرفة الساخنة. إذا كان مطلوبا CO2، يمكن بالغاز قوارير من إمدادات أسطوانات أوCO2.

المراجع