أفلاتوكسين

الهجريب الكيميائي

السموم الفطرية أوأفلاتوكسين Aflatoxins، هي مسرطنات سامة تنتجها بعض الأعفان (Aspergillus flavus وAspergillus parasiticus) والتي تنموفي التربة، الخضروات المتحللة، القش، والحبوب. توجد طبيعياً في الأغذية الرئيسية المخزنة بطريقة غير سليمة، مثل الكاساڤا، الفلفل الحار، الذرة، بذرة القطن، الدخن، الفول السوداني، الأرز، بذور السمسم، السورغم، بذور عباد الشمس، المكسرات، القمح، ومجموعة متنوعة من التوابل. عندما يتم معالجة الأغذية الملوثة، تدخل السموم الفطرية في الإمدادات الغذائية العامة حيث تتواجد في أغذية الإنسان والحيوانات الأليفة، مثل المواد الأولية المقدمة لحيوانات المزارع. وبدورها فإن الحيوانات التي تتغذى على الأغذية الملوثة تنقل السموم الفطرية إلى البيض، منتجات الألبان، واللحوم. على سبيل المثال، في پاكستان، عثر حتى الدواجن التي تتغذى على أعلاف ملوثة بالسموم الفطرية، تحتوي لحومها وبيضها على نسب عالية من تلك السموم.

يتأثر الأطفال بشكل خاص بالتعرض للسموم الفطرية، مما يؤدي إلى توقف النمو، وتأخر التطور، أضرار بالكبد، والإصابة بسرطان الكبد. أما الكبار فهناك تفاوت في تعرضهم لأضرار السموم الفطرية، لكنهم أيضاً معرضون للخطر. لا توجد حيوانات لديها مناعة من السموم الفطرية. تعتبر السموم الفطرية من بين أكثر المسرطنات المعروفة. بعد دخولها الجسم، يقوم الكبد باستقلابها لتتحول إلى الإپوكسيد أوالهيدروكسيل التفاعلي مكونة أفلاتوكسين م₁ الأقل ضرراً.

ويشيع تناول الأفلاتوكسينات مع الطعام. إلا حتى أكثر أنواع الأفلاتوكسين سمية، B₁، يمكنها التخلل عبر البشرة.

مستويات العمل التي تحددها ادارة الطعام والدواء الأمريكية للأفلاتوكسين المتواجد في الطعام أوالأعلاف هو20 to 300 ppb. وقد تجاوز للـ FDA حتى أعربت أوامر بسحب أغذية للبشر وللحيوانات كإجراء وقائي لمنع التعرض للأفلاتوكسين.

اسم السموم الفطرية (aflatoxin) مشتق من اسم أحد أنواع العفن mold التي تنتجها، (Aspergillus flavus). وقد صيغ ذلك في حوالي عام 1960 بعد اكتشافه كمسبب لسقم الديك الرومي ” “Turkey X disease. والسموم الفطرية (Aflatoxin) من أحد التجمعات الرئيسية للسموم الفطرية Mycotoxin.

نظرة عامة

تُعتبر السموم الفطرية من أخطر السموم على صحة الإنسان والحيوان، وأشهرها أربعة هي: الأفلاتوكسين، الفيومونسين، الزيرالونين، والفيوميتوكسين، إلا حتى الأفلاتوكسين هوأشهرها وأخطرها على الإطلاق، فهويوجد في عدد كبير من الأطعمة، ويكفي حتى يتعرض الشخص لكمية ضئيلة منه، لا تتعدى أجزاء من المليون، كي تودي به. وأشارت منظمة الصحة العالمية إلى حتى التسمم بالأفلاتوكسين يمكن حتى يسبب الوفاة، وإذا ما تعرّض له الأطفال لمدة طويلة فإن مضاعفات كبيرة قد تلحق بهم، أبرزها التقزم، نقص الوزن، وتضرر الجهاز المناعي. وتدخل سموم الأفلاتوكسين إلى جسم الإنسان إما بطريقة مباشرة بواسطة الأغذية، وإما بطريقة غير مباشرة من خلال تناول منتجات مصدرها حيوانات تجاوز لها حتى تغذت على أعلاف ملوّثة بالسموم الفطرية، وهي الأخطر خصوصاً على الأطفال. ويتم إنتاج سموم الأفلاتوكسين من فطر اسمه أسبيرجلس فلافوس، ينموويترعرع على أغذية كثيرة أبرزها الفول السوداني، المكسرات (الفستق والجوز والكاجوواللوز)، الذرة، القمح، الأرز، الشعير، البذور الزيتية، البقوليات، الفواكه الملوثة، التمور، الصعتر، والقهوة.

والسموم الفطرية هي تعبير عن نواتج التمثيل الغذائى الثانوى للفطريات السامة وهي مركبات نشطة بيولوجياً وأغلبها سام للانسان والحيوان والنبات والكائنات الدقيقة فالسام منها للإنسان والحيوان يسمى Mycotoxins (السموم الفطرية) والسام للنبات يسمى phytotoxins. أما المركبات السامة للكائنات الدقيقة يطلق عليها اسم Antibitotics (المضادات الحيوية). إذا هناك اتفاق على حتى يطلق على النواتج الثانويه للفطريات لفظ الميكوتوكسينات وتنتج الفطريات حوالى 280 مركبا ساما يندرج تحت 21 مجموعه من السموم اخطرها على الاطلاق مجموعتى الأفلاتوكسينB1 والأوكراتوكسين A. وجميعها مركبات ذات وزن جزيىء صغير جدا وهى مركبات Immunogenic بمعنى ان الجسم لاقد يكون لها أجسام مضادة.

كيفية تكون السموم الفطرية

عندما تنموالفطريات على بيئة مناسبة فإنها تقوم بعملية التمثيل الغذائى مستخدمة فى ذلك الجلوكوز فى قليل من الأحوال لتعطى نواتج تمثيل غذائى ثانوى ولكن فى اغلب الاحوال تكون نواتج التمثيل الغذائى الثانوىمن نواتج التمثيل الغذائى الأولى وهى مركبات وسطيه فى عملية الأيض الغذائى وهى مشتقه اما من الجلوكوز أوالأحماض الدهنية أوالتربينات والاسترويدات أوالأحماض ثلاثية الكربوكسل أوالاحماض الأمينية.

في الأعلاف

ويمكن حتى تنتج هذه السموم فى الحقل قبل الحصاد أوبعد الحصاد وأثناء تخزين مواد العلف المتنوعة.

نتيجة لنموالفطريات تقوم بعمليات التمثيل الغذائى وتنتج السموم الفطرية ونموالفطريات يحتاج توفر ظروف بيئية محددة مثل:

زيادة نسبة الرطوبة فى مواد العلف- التخزين الردىء - وجود وفرة من الأكسوجين - تلوث مواد العلف بالفطريات – حدوث ضرر ميكانيكى لمواد العلف.

عند تخزين بعض مواد العلف مثل الذرة يمكن تخزينها جافة تماما ويستحسن حتى تخزن دون تفريط مع تهوية المخازن وتقليل نسبة الرطوبة أثناء التخزين.

وتعتبر السموم الفطرية مركبات ثابتة لا يحدث لها تحلل أوتكسير أثناء عمليات تجهيز مواد العلف وخلطها معا ولذا لابد من العمل على تقليل نسبة إصابة مكونات العلائق بهذه المواد حتى نحافظ على إنتاجية الحيوانات الزراعية وتقليل مخاطر التلوث بهذه السموم.

وتعتبر فطريات Aspergillus – Fusarium - Penicillium من أبرز الفطريات التى تنتج السموم الفطرية المتنوعة.

فطر Aspergillus ينتج الأفلاتوكسين (Aflatoxin) وفطر Fusarium ينتج جميع من الـ Zearalenone ومركب Deoxynivalenol )DON) وT-2 Toxin وFumonisin ويلاحظ حتى فطر Penicillium ينتج مركب Ochratoxi.

فطر الـ Fusarium غالبا يصيب الذرة والقمح والشعير، ويلاحظ حتى زيادة نسبة الرطوبة مع ازدياد درجة الحرارة البيئية فى هذه النباتات تزيد من فرصة الإصابة بهذا الفطر وتكون نواتج التمثيل الغذائى الثانوى (السموم الفطرية).

نموهذه الفطريات يحتاج درجة حرارة ما بين 23 و140 درجة فهرنهيتى ونسبة رطوبة جوية حوالى 70%، مع درجة pH معتدلة مع وفرة فى الأكسوجين. الـAspergillus يحتاج لدرجة رطوبة منخفضة مع درجة حرارة مرتفعة ولكن مع حدوث تكسير فى الحبوب المخزنة وينتج الأفلاتوكسين.

فى حين فطر الـ Fusarium يحتاج نسبة مرتفعة من الرطوبة ويمكن حتى ينموفى درجات حرارة منخفضة.

وتلوث علف الحيوانات بالسموم الفطرية يقلل من معدل نموالحيوانات وكذلك انخفاض إنتاج اللبن وتقلل من الخصوبة.

تمتص السموم الفطرية عن طريق القناة الهضمية مما يؤثر فى عملية التمثيل الغذائى وكذلك معدل نشاط الغدد الصماء المتنوعة أى حدوث خلل فى إفراز الهرمونات وانخفاض نشاط الجهاز المناعى للحيوانات. السموم الفطرية تسبب الكثير من المخاطر للإنسان وحيوانات المغرسة.

ويجب التمييز بين تأثير السموم الفطرية وكذلك السم الناتج من بعض البكتريا. حيث حتى السموم البكتيرية مواد بروتينية تسبب أعراض تظهر خلال ساعات قليلة ويبدأ جسم الإنسان أوالحيوان فى إنتاج أجسام مناعية ضد هذه السموم البكتيرية.

فى حين حتى السموم الفطرية مركبات كيميائية لها وزن جزئ منخفض لا ينتج داخل الجسم مواد مضادة لها، عموما السموم الفطرية من السموم التى تسبب أعراض تدريجية تزداد بزيادة تراكم السموم داخل جسم الحيوان.

تسبب السموم الفطرية فشل فى نشاط الكبد والكلى وتدميرفى الجهازالعصبى المركزى واختلال فى النشاط الهرمونى فى جسم الحيوان وفقد الحيوان للشهية وعدم تناول الغذاء وفى النهاية موت الحيوان.

يلاحظ عند تغذية الحيوانات على علائق تحتوى سموم فطرية يقل معدل النموأويتوقف تماما النمو- ينخفض إنتاج اللبن – تكون الحيوانات أكثر عرضة للإصابة بالأمراض (تقل المناعة) – حدوث إسهال متبتر – الروثقد يكون به آثار من الدماء – لا تستجيب هذه الحيوانات للعلاج باستخدام العقاقير البيطرية.

الأنواع الرئيسية ومستقلباتها

يوجد 14 نوع مختلف من السموم الفطرية التي تنتج في الطبيعة. ويعتبر الأكثر سمية وينتج عن طريق Aspergillus flavus وAspergillus parasiticus. أفلاتوكسين M₁ ويوجد في مرق خميرة Aspergillus parasiticus، ولكنه هووأفلاتوكسين M₂ يتم إنتاجهم عندما يقوم الكبد المصاب بإنتاج B₁ وB₂.

أفلاتوكسين B₁ وB₂، ينتج عن طريق Aspergillus flavus وA. parasiticus
أفلاتوكسين G₁ وG₂، وينتج عن طريق A. flavus وAspergillus parasiticus
أفلاتوكسين M₁، استقلاب لأفلاتوكسين B₁ في البشر والحيوانات (التعرض بمستويات ng قد يأتي من لبن الأم.)
Aflatoxin M₂، مستقلب الأفلاتوكسين ب₂ في لبن المواشي التي تغذت بأعلاف ملوثة
Aflatoxicol
أفلاتوكسين Q₁ (AFQ₁)، مستقلب رئيسي لـ AFB₁ في in vitro التحضيرات الكبدية بالفقاريات العليا الأخرى

شروط الإصابة

Aspergillus fumigatus as seen under an electron microscope

فهم الأمراض

لا يوجد نوع من الحيوانات في مأمن من الاثار السمية الحادة الناتجة من السموم الفطرية، البشر البالغين لديهم مقدرة عالية لمقاومة السموم الفطرية ونادرا ما يقع بالغ فريسة للتسمم في السموم الفطرية الحادة.

لكن الاطفال يتأثرون بشكل خاص وتعرضهم لسموم الفطرية قد يؤدي الى توقف النمووتأخر التطور، بالاضافة الى الاعراض المذكورة ادناه.

التعرض لسموم الفطرية في أعلى المستويات يسبب النخر الكبدي، والذي يؤدي في وقت لاحق الى الى تليف الكبد، أوسرطان الكبد.

وأعراض الفشل الكبدي تظهر بنزيف وذمة وتغير في الهضم وتغير في الامتصاص و/ أوتغير في عمليات الايض للأغذية والتغيرات العقلية و/أوغيبوبة.^[]

التعرض المزمن يزيد من خطر الاصابة بسرطان الكبد، وكما حتى ايض السموم الفطرية السموم الفطرية يمكن ان يقتحم ال DNA ووتتم ألكلت القواعد خلال ال epoxide moiety . ويعتقد حتى هذا ما يسبب طفرات في الجين p53، مورثة مهمة في منع تقدم دورة الخلية عندماقد يكون هناك طفرات الحمض النووي DNA أويشير الى signaling apoptosis (موت الخلية المبرمج). وهذه الطفرات يعتقد أنها تؤثر على بعض مواقع أزواج القواعد أكثر من غيرها على سبيل المثال القاعدة الثالثة للكودون 249 للجين p53 أكثر عرضة للطفرات بواسطة السموم الفطرية من القواعد القريبة.

ويتأثر التعبير عن الامراض المتعلقة في السموم الفطرية عن طريق عدة عوامل مثل النوع، العمر، التغذية، الجنس، امكانية التعرض المتزامن للسموم اخرى. الجهاز المستهدف الرئيسي في الثديات هوالكبد، وبتالي تسمم السموم الفطرية هوفي المقام الاول سقم الكبد . شروط تزيد من احتمال حدوث التسمم السموم الفطرية للانسان، محدودية توافر الغذاء، الظروف البيئية التي تشجع نموالعفن على المواد الغذائية، عدم وجود نظم تنظيمية لرصد السموم الفطرية السموم الفطرية والسيطرة عليها.

واتباع نظام غذائي منتظم بما في ذالك الخضار مثل الجزر، والجزر الابيض، والكرفس، والبقدونس قد يقلل من تأثيرات المسرطنة للسموم الفطرية.

Aflatoxin B1 يمكن ان يسبب ضعف المناعة، والتعرض له يزيد من الحِمل الفيروسي في فيروس نقص المناعة البشرية HIV.

لا يوجد ترياق محدد للتسمم الفطري. رعاية الأعراض والعناية الداعمة مصممة خصيصا لشدة سقم الكبد قد تضم على السوائل الوريدية مع سكر العنب {dextrose وفيتامينات منشطة k وفيتامين ب، وحمية غذائية عالية البروتين ومحتوى كاف من الكربوهيدرات.

إصابة البشر

هناك نوعين من التقنيات التي استخدمت في معظم الاحيان للكشف عن مستويات السموم الفطرية في الانسان.

الطريقة الاولى … هي في قياس ال guanine adduct -AFB1 في عينة البول. ووجوده يشير لتعرض الى Aflatoxin B1 خلال 24 ساعة الماضية. يقيس هذا الاسلوب فقط الاصابة الجديدة مع ذالك خلال منتصف عمر الايض , مستوى ال AFB1-guanine التي تقاس قد تختلف من يوم لاخر، اعتمادا على النظام الغذائي ,وهي ليست مثالية لتقييم الاصابة على المدى الطويل.

الطريقة الثانية … قياس مستوى AFB1-albumin في مصل الدم. وهذا النهج يوفر قياس أكثر تكاملاً للاصابة على مدى عدة أسابيع أوأشهر.

إصابة الحيوانات

بعض الموضوعات ابدت اقتراحتها في مستوى السمية في طعام الكلاب هي ما بين 100-300 ppb (جزء في البليون) ويتطلب التعرض المستمر أولااستهلاك لبضعة أسابيع إلى أشهر لتطور السموم الفطرية.

لا توجد معلومات تشير الى تسقطات تغطي حتى الكلاب ستخضع لاحقا إلى سقم ناجم عن السموم الفطرية.

التسمم بالسموم الفطرية

تتمثل أعراض الإصابة بالسموم الفطرية في التالي: - انزعاج مستمر في المعدة. - نفخة في البطن. - فقدان الشهية على الأكل. - معاناة من التقيؤات المتكررة. - قرقرة في البطن. - حمى وصفار الجلد والعينين. - تورم البطن، وتضخم الطحال والكبد. - نزف من الجهاز الهضمي. - إصابة بالغيبوبة.

العلاج

لا يوجد علاج للتسمّم بالأفلاتوكسين، لكن هناك أطباء ينصحون بأخذ جرعات داعمة من الفيتامين ي والسلينيوم، كونها تفيد في التخفيف من حدة التسمم. أما في شأن الوقاية، فإن السبيل الأفضل هومنع تشكّل الفطريات التي تنتج سموم الأفلاتوكسين وحماية الأغذية من التلوّث بها. لا يمكن تلافي تلوّث الغذاء بسموم الأفلاتوكسين حتى مع استخدام التقنيات العالية في التصنيع الغذائي، ولا تتوافر، من الناحية العملية، أي طريقة يمكن الاعتماد عليها لمنع وصول هذه السموم الى الأغذية التي نتناولها، لهذا سمحـت إدارة الدواء والغذاء الأميركية بوجودها بنسبة معينة لا يجب تجاوزها.

الوقاية

هل من سبيل لتقليل كمية السموم الواصلة من طريق الطعام؟ إن الالتزام بالنصائح الآتية يفيد على هذا الصعيد: - شراء الأغذية المنتجة حديثاً وبكميات قليلة ومن مصادر موثوقة. - تخزين الأغذية في أماكن جافة وباردة، بعيداً من الرطوبة الزائدة التي تشجّع على نموالفطريات. - إذا لاحظت نموالعفن على الغذاء، عمليك وضعه في كيس محكم الإغلاق ورميه في سلة المهملات. - تنظيف الثلاجة في شكل دوري وفاعل. - الحرص على حتى تكون نسبة الرطوبة في المطبخ أقل من 40 في المئة. - إذا كان الغذاء يحتوي على جزء مصاب بالفطريات، عمليك التخلّص منه بالكامل، ولا تحاول أبداً بتر الأجزاء السليمة من الغذاء عن الجزء المصاب بالفطريات لاستخدامها، بل يجب التخلّص من الغذاء دفعة واحدة. - العناية بنظافة أماكن تحضير الطعام في المطبخ، والحرص على إبقائها جافة دوماً.

قائمة التفشي الوبائي

2003 كينيا: تسمم حاد، 120 وفاة مؤكدة.
فبراير–مارس 2013: رومانيا، صربيا، كرواتيا، نقلتها إلى غرب أوروبا - 2013 aflatoxin contamination.
فبراير 2013: تلوث إيوا.
2014 (مستمر): نيپال وبنگلادش، إصابات بين حديثي الولادة، وُجد في دماء الحبل السري.

انظر أيضاً

Aflatoxin total synthesis
تلوث السموم الفطرية 2013
Mycotoxins in animal feed

الهوامش

^ Fratamico, PM; et al., eds. (2008). Foodborne Pathogens: Microbiology and Molecular Biology. Horizon Scientific Press. ISBN .
^ Iqbal, Shahzad Zafar; et al. (2014). "Natural incidence of aflatoxins, ochratoxin A and zearalenone in chicken meat and eggs". Food Control. 43: 98–103. doi:10.1016/j.foodcont.2014.02.046.
^ Abbas, Hamed K. (2005). Aflatoxin and Food Safety. CRC Press. ISBN .
^ Hudler, George W. (1998). . Princeton University Press. ISBN .
^ Boonen, Jente; Malysheva, Svetlana V.; Taevernier, Lien; Diana Di Mavungu, José; De Saeger, Sarah; De Spiegeleer, Bart (2012). "Human skin penetration of selected model mycotoxins". Toxicology. 301 (1–3): 21–32. doi:10.1016/j.tox.2012.06.012. PMID 22749975.
^ "Guidance for Industry: Action Levels for Poisonous or Deleterious Substances in Human Food and Animal Feed". Food and Drug Administration. August 2000. Retrieved March 10, 2013.
^ Wannop, C. C. (March 1961). "The Histopathology of Turkey "X" Disease in Great Britain". Avian Diseases. 5 (4): 371–381. doi:10.2307/1587768. JSTOR 1587768.
^ السموم الفطرية وطرق الوقاية منها
^ Boutrif, E. (1998). "Prevention of aflatoxin in pistachios". Food, nutrition and agriculture. 21.
^ Geiser, David M; Dorner, Joe W; Horn, Bruce W; Taylor, John W (2000-12-01). "The Phylogenetics of Mycotoxin and Sclerotium Production in Aspergillus flavus and Aspergillus oryzae". Fungal Genetics and Biology. 31 (3): 169–179. doi:10.1006/fgbi.2000.1215.
^ Aflatoxin M2 product page from Fermentek
^ Smith, John E.; Sivewright-Henderson, Rachel (1991). . CRC Press. p. 614. ISBN .
^ Williams JH, Phillips TD, Jolly PE, Stiles JK, Jolly CM, Aggarwal D (November 2004). "Human aflatoxicosis in developing countries: a review of toxicology, exposure, potential health consequences, and interventions". Am. J. Clin. Nutr. 80 (5): 1106–22. PMID 15531656.
^ Nogueira L, Foerster C, Groopman J, Egner P, Koshiol J, Ferreccio C (2015-05-26). "ASsociation of aflatoxin with gallbladder cancer in chile". JAMA. 313 (20): 2075–2077. doi:10.1001/jama.2015.4559. ISSN 0098-7484.CS1 maint: extra punctuation (link)
^ Aguilar F, Hussain SP, Cerutti P (September 1993). "Aflatoxin B1 induces the transversion of G→T in codon 249 of the p53 tumor suppressor gene in human hepatocytes". Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 90 (18): 8586–90. doi:10.1073/pnas.90.18.8586. PMC 47402. PMID 8397412.
^ Machida M, Gomi K, eds. (2010). Aspergillus: Molecular Biology and Genomics. Caister Academic Press. ISBN .
^ Peterson S, Lampe JW, Bammler TK, Gross-Steinmeyer K, Eaton DL (September 2006). "Apiaceous vegetable constituents inhibit human cytochrome P-450 1A2 (hCYP1A2) activity and hCYP1A2-mediated mutagenicity of aflatoxin B1". Food Chem. Toxicol. 44 (9): 1474–84. doi:10.1016/j.fct.2006.04.010. PMID 16762476.
^ Jolly, P.E.; Inusah, S.; Lu, B.; Ellis, W.O.; Nyarko, A.; Phillips, T.D.; Williams, J.H. (2013). "Association between high aflatoxin B₁ levels and high viral load in HIV-positive people". World Mycotoxin Journal. 6 (3): 255–261. doi:10.3920/WMJ2013.1585.
^ "Common food fungus can accelerate onset of AIDS". digitaljournal.com. September 1, 2013.
^ السموم الفطرية القاتلة... من طعامك الى الكبد، الحياة اللبنانية
^ "Aflatoxin threat in Nepal, Bangladesh". SciDev.Net South Asia. 2014-12-17. Retrieved 2016-10-17.
^ "Eastern and Southern Africa 2011 Highlights" (PDF). ICRISAT. 2012. Retrieved 17 October 2016.
^ "Dog food recall underscores toxic danger in drought-hit U.S. corn". Reuters. February 25, 2013.

خطأ استشهاد: الوسم <ref> ذوالاسم "bao" المُعرّف في <references> غير مستخدم في النص السابق.
خطأ استشهاد: الوسم <ref> ذوالاسم "peanut" المُعرّف في <references> غير مستخدم في النص السابق.
خطأ استشهاد: الوسم <ref> ذوالاسم "analytical" المُعرّف في <references> غير مستخدم في النص السابق.
خطأ استشهاد: الوسم <ref> ذوالاسم "leong" المُعرّف في <references> غير مستخدم في النص السابق.
خطأ استشهاد: الوسم <ref> ذوالاسم "bingham" المُعرّف في <references> غير مستخدم في النص السابق.
خطأ استشهاد: الوسم <ref> ذوالاسم "bastianello" المُعرّف في <references> غير مستخدم في النص السابق.
خطأ استشهاد: الوسم <ref> ذوالاسم "rawal1" المُعرّف في <references> غير مستخدم في النص السابق.
خطأ استشهاد: الوسم <ref> ذوالاسم "rawal2" المُعرّف في <references> غير مستخدم في النص السابق.
خطأ استشهاد: الوسم <ref> ذوالاسم "aflacontrol" المُعرّف في <references> غير مستخدم في النص السابق.
خطأ استشهاد: الوسم <ref> ذوالاسم "tosun" المُعرّف في <references> غير مستخدم في النص السابق.