طريقة إعداد المحضرات النباتية
تقسم محضرات الفحص المجهري إلى قسمين:
- محضرات مؤقتة:
وهي المحضرات التي تدرس في وقت قصير جداً ولا بحاجة للحفظ وتتبع في إعدادها الكيفية التالية:
- توضع قطرة من الماء أوالوسط المراد استعماله في مركز صفيحة زجاجية نظيفة وذلك بالاستعانة بقطارة نظيفة.
- يوضع المحضر في منتصف قطرة الماء بعد التقاطه بالحربة ويغمر تماماً.
- تؤخذ ساترة نظيفة وتمسك بعد وضع أحد أضلاعه على طرف الصفيحة بزاوية 45 ْ وتحرك حتى تصبح ملامسة لقطرة الماء ثم تهجر لتسقط تدريجياً فوق المبتر. تمنع هذه الكيفية تشكل فقاعات الهواء التي يمكن حتى تتشكل طالما وضع الساترة بطريقة عمودية.
- محضرات دائمة:
وهي المحضرات التي نستطيع الاحتفاظ بها فترة طويلة تتراوح بين أسبوع أوعدة أشهر. ويمكن تحضيرها كما يلي:
- تتثبت الأجزاء النباتية المدروسة كيميائياً أوفيزيائياً, ثم تغسل بالماء لإزالة أثر المثبت.
- يجري تجفيف هذه الأجزاء بنزع الماء بالكحول , وذلك بوضعها في محاليل متدرجة التخفيف من الكحول تبدأ بـ 30%وتنتهي بـ 100%, كما يمكن حفظ المحضرات في محلول 70% كحولاً إذا دعت الحاجة.
- توضع الأجزاء النباتية في شمع البرافين .
- تجرى مقاطع رقيقة باستعمال جهاز تحضير المقاطع الدقيقة Microtome.
- يزال الشمع من المقاطع باستعمال محل مناسب (تولوين Toluene أوإكزيلول Xylole), ثم يزال المحل بتمرير المقاطع على الكحول المطلق 100%.
- توضع المقاطع في المحاليل التالية: 96% كحول, 70%, 50%, 30% كحولاً, ثم في الماء إذا كانت الصبغة التي ستستخدم مذابة في الماء. أما إذا كانت مذابة في الكحول فتنقل المقاطع نفسها إلى درجة الكحول المستخدمة.
- تمرر المقاطع على بعض المحاليل الصبغية لتلوينها.
- تجفف المقاطع ثانية بإمرارها على تراكيز تصاعدية من الكحول (50%, 70%, 85%, 95% ثم 100%)
- يستعمل مذيب عضوي مناسب لترويق المقاطع مرة ثانية.
- يؤخذ أحد المقاطع ويوضع على الصفيحة الزجاجية ويغطى بساترة تشرب حوافها بمادة الراتنج أوأي مادة تمنع تسرب الهواء إلى المبتر.
